Осуществляется выделением вируса и серологическими реакциями. Для выделения вируса берут смыв слизи из носоглотки, зева, отделяемого конъюнктивы или из фекалии больных. Исследуемым материалом заражают первичные и перевиваемые культуры эпителиальных клеток человека. Наблюдение ведут в течение 2 недель. О наличии вируса и его принадлежности к аденовирусам судят по характеру цитопатического действия. Типирование вируса производится в реакции нейтрализации с типоспецифическими сыворотками на клетках человека и обезьян. Для серологического диагноза дважды берут кровь больного (парные сыворотки) в первые дни заболевания и в период реконвалесценции. В полученной сыворотке определяют наличие антител с помощью реакций нейтрализации, связывания комплемента и торможения гемагглютинации.